高效液相色谱法是在气相色谱和液相色谱的基础上发展起来的，因为其操作简单，结果准确、效率高，尤其对那些高沸点不易挥发、热稳定性差的、高分子的、具有不同极性的有机化合物，生物活性物质和各种天然的物质，高效液相色谱法都能进行分离和分析。因而目前在各个方面都已得到了广泛的应用。
- 高分离率（应用10μm以下规则均匀的极细颗粒为固定相，所以传质阻抗小，柱效高，一般在1×103~5×105n/m）；
- 高速（采用2×103~ 3×104kPa的高压输液泵输送液体流动相，使其具有高流速，数分钟至几十分钟可完成试样分析）；
- 高灵敏度（广泛使用了高灵敏检测器，只需要试样10-7~10-2g）
高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、数据处理系统等几部分组成（如图1所示）。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附——解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
该系统包括储液瓶、高压泵和梯度仪三部分。贮液瓶和梯度仪可使流动相随固定相和样品的性质而改变，进而使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。当高压流动相通过层析柱时，高压泵可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。该系统核心部件是色谱柱。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由优质不锈钢、厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，如图2所示。常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。该检测器适用于对紫外光（或可见光）有吸收性能样品的检测。灵敏度高线性范围宽、对温度和流速变化不敏感、可检测梯度溶液洗脱的样品。凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。但灵敏度低（检测下限为10-7g／ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。 只适用于具有荧光的有机化合物（如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等）的测定，其灵敏度很高，痕量分析和梯度洗脱样品的检测均可采用。
对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作。
（1）生物领域：氨基酸、多肽、蛋白质、核碱、核苷、核苷酸、生物胺和核酸的分析研究；（2）医药领域：常用药物、甾体药物、抗菌素类、生物碱、手性药物研究中的研究；（3）食品领域：糖类、有机酸及酸味剂、维生素、食品添加剂、食品污染物的分离分析；（4）环境领域：多环芳烃、多氯联苯、农药残留、酚类和胺类的检测；（5）精细化工方面：聚合物、醇、醛和酮、醚、酸和酯、表面活性剂分离分析和研究；
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